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      支原體去除劑的使用方法,工作濃度,對細胞有影響嗎?

      Release Time:2022-10-13

      支原體去除劑的工作濃度:
      1. 將支原體清除劑添加到被支原體污染的細胞培養物中,濃度建議為5µg/ml,并培養1周;
      2. 只有當推薦濃度對去除支原體無效時,才能將支原體去除劑濃度提高至10µg/ml;
      3. 對于培養基更換或培養物轉移(傳代),使用含有相同濃度支原體清除劑的培養基;
      4. 在不使用支原體清除劑的情況下轉移細胞培養物數次,并確認污染支原體沒有再生。
      支原體去除劑產品HCQ001000


      支原體清除劑注意事項(細胞影響):

      1. 如果不能去除血清或胰蛋白酶中的支原體,可以將濃度為5µg/ml的支原體清除劑添加到培養基中,以防止接觸這些產品的細胞培養物受到污染;
      2. 支原體清除劑自發貨之日起保質期長達5年,在室溫下也很穩定,但應避光以防分解;
      3. 支原體清除劑的細胞毒性較低,但是,當用支原體去除劑處理時,高度受支原體污染的細胞培養物可能會表現出細胞特性的改變或對細胞毒性抗生素的敏感性,因此,在這些情況下,建議在處理后檢查預期的細胞特性。
      支原體清除劑案例數據
      下表顯示感染水平、細胞類型和支原體菌株可能會影響特定結果。我們鼓勵研究人員將此數據作為有用的指南,以指示其特定細胞系和支原體菌株所需的有效支原體清除劑濃度。
      支原體清除效果-自發性感染
      MRA濃度 (ug/ml) 天數
          0 7 14 21
      Human-derived cell-A 3.9 + - - -
        2 + - - -
        1 + - + +
        0 + + + +
      Human-derived cell-B 7.8 + - - -
        3.9 + - - -
        2 + - - -
        1 + + + +
        0 + + + +
      (+)=支原體陽性,(-)=支形體陰性,(天*)=培養階段的支原體狀態(天)。
      參考文獻:

      1. Molla Kazemiha V. et al. 2011. Efficiency of Plasmocin on various mammalian cell lines infected by mollicutes in comparison with commonly used antibiotics in cell cultures: a local experience. Cytotechnology. Dec; 63(6):609-20.
      2. Uphoff C. C. et al., 2012. Treatment of mycoplasma contamination in cell cultures with Plasmocin. J Biomed Biotechnol. 2012:267678.
      3. Rongvaux A. et al., 2014. Development and function of human innate immune cells in a humanized mouse model. Nat Biotechnol. 32(4):364-72.
      4. Baronti C. et al., 2013. Mycoplasma removal: simple curative methods for viral supernatants. J Virol Methods. 187(2):234-7.
      5. Deng F. et al. 2012. Generation of induced pluripotent stem cells from human Tenon's capsule fibroblasts. Mol Vis. 18:2871-81.
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